Identifikacija citomegalovirusnog gena koji pokreće stvaranje odjeljka za sklapanje viriona
Izvor financiranja:
Broj projekta: uniri-mzi-25-40
Suradnici:
- prof. dr. sc. Hana Mahmutefendić Lučin, Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- prof. dr. sc. Gordana Blagojević Zagorac, Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- doc. dr. sc. Ljerka Karleuša Mujkić, Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- dr. sc. Silvija Lukanović Jurić, Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- dr. sc. Martina Deželjin, Institut Ruđer Bošković, Zagreb
- dr. sc. Marina Marcelić, Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- dr. sc. Ivona Viduka, Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- Alen Omerović, dr. med., Medicinski fakultet, Sveučilište u Rijeci
- prof. Dr. Zsolt Ruzsics, University Freiburg
- prof. Dr. Martin Messerle, University Hannover
- prof. dr. Jaako Saraste, University Bergen
Ukupno financiranje: 82.344,39 €
Kratki opis projekta:
Humani citomegalovirus (HCMV), važan humani patogen koji inficira većinu populacije, ekstenzivno preuređuje membranski sustav stanice i stvara veliku strukturu poznatu kao odjeljak za sklapanje viriona (engl. assembly compartment, AC). Razvoj AC odvija se sličnim slijedom u stanicama inficiranim mišjim CMV-om (MCMV). Za razliku od HCMV-a, gdje se AC razvija od 24 do 72 sata nakon infekcije, temeljna konfiguracija AC (preAC) u stanicama inficiranim s MCMV-om uspostavlja se brzo, u razdoblju 5-7 sati nakon infekcije. To omogućuje uspostavljanje tehnički prikladnijih eksperimentalnih pristupa u nastojanju da se odgovori na pitanje kako nastaje AC, jedno od ključnih pitanja za razumijevanje biologije i patogeneze CMV infekcije na koje se pokušava odgovoriti u posljednjih 25 godina.
Od nedavno dostupan kodirajući potencijal MCMV-a pokazuje da 170 gena izražava 380 virusnih transkripata. U ranoj fazi infekcije prije uspostavljanja preAC, izražavaju se 34 (β1) i 55 (β2) transkripta u dva slijedna vala. Cilj ovoga projekta je uporabom kontroliranog izražaja β1 i β2 gena, delecijskih mutanti MCMV-a i siRNA identificirati virusni gen koji izaziva nastanak preAC (virusni transkript za preAC, VT-preAC). Biogeneza preAC pratit će se imunofluorescencijom, konfokalnom i digitalnom holotomografskom (DHTM) mikroskopijim kao dislokacija Golgijeva kompleksa i tubulacija endosomalnog sustava. Produkt identificiranog VT-preAC će se detaljno karakterizirati biokemijski i funkcionalno. Transfekcijom VT-preAC će se izazvati slična konfiguracija u neinficiranim stanicama a sa shRNA za VT-preAC i siRNA za virusne gene istražit će se uloga M48, M94 i M103 u biogenezi AC. GFP-VT-preAC će se koristiti za snimanje na živim stanicama DHTM-om i analize s markerima membranskog sustava. VT-preAC-BioID2 će se koristiti u BioID testu i maseno-spektrometrijsku identifikaciju staničnih proteina s kojim VT-preAC stupa u interakciju (interaktom) kako bi se identificirao mehanizam biogeneze preAC i AC.
Fotografije (vizualni sažetak ili ostale fotografije koje ilustriraju istraživanje):
Publikacije:
Pozvana predavanja:
Usavršavanja:
Odobreni projekti za financiranje:
- Voditelj projekta
- lzlazak citomegalovirusa iz stanice putem Rab15-pozitivnih membranskih odjeljaka. HRZZ (lP-2024-05-4995), 199.855,92 EUR, 2024. – 2027.
- Projekt razvoja karijera mladih istraživača – izobrazba novih doktora znanosti. HRZZ (DOK-2020-01-3952), 72.000 EUR, 2020. – 2024.
- Sekundarno omatanje i izlazak beta-herpesvirusa iz stanice. HRZZ (IP-2019-04-3582), 178.000 EUR, 2020. – 2023.
- Projekt razvoja karijera mladih istraživača – izobrazba novih doktora znanosti. HRZZ (DOK-2015-10-2825), 72.000 EUR, 2015. − 2021.
- Rana faza razvoja kompleksa za stvaranje viriona tijekom citomegalovirusne infekcije. HRZZ (IP-2014-09-9564), 106.000 EUR, 2015. – 2019.
- Sortiranje MHC molekula I razreda na staničnoj membrani i endocitoznim odjeljcima. MZOŠ RH (projekt 062-0620238-0223), 2006. − 2013.
- Endocitoza glikoproteina, virusa i intracelularne bakterije. MZT RH (projekt 0062030). 2000. − 2006.
- Citomegalovirusni geni za izbjegavanje imunološkog odgovora. MZT RH (projekt 062006), 1996. − 2000.
- Aktivno sudjelovanje u projektu
- Reorganizacija sučelja između ranih endosoma i endosomalnog reciklirajućeg odjeljka u ranoj fazi infekcije citomegalovirusom. HRZZ (IP-2020-02-2916), voditeljica Hana Mahmutefendić Lučin, 121.000 EUR. (2021. − 2024.)
- Imunoreakcije na hantaviruse i leptospire. MZOŠ RH (143-1430115-0103), voditeljica Alemka Markotić. (2006. − 2013.)
- Mreža izvrsnosti Šestog okvirnog programa “The control of embryo implantation: studies of gene expression, protein profiles / functions at the utero embryonic level: cellular and molecular developmental events at the feto-maternal interface” (EMBIC), Framework 6 EU (Contract No 512040) (LSHM-CT-2004-512040), 2004. – 2008.
- Characterization of immune mechanisms essential for control of cytomegalovirus latency and recurrence, U.S.-Croatian Science/Technology Program, voditelj Stipan Jonjić, 1992. − 1995.
- Mehanizmi kontrole citomegalovisrusne infekcije. MZT RH (3-01-169), voditelj Stipan Jonjić, 1991. − 1994.
Poveznice na ostale stranice projekta:
CroRIS
